Sviluppo e analisi di Real-Time PCR ad ampio spettro per il rilevamento microbico

Il controllo qualitativo è una pratica utilizzata in laboratorio per cercare eventuali microrganismi che contaminano i campioni. I metodi convenzionali sfruttano la coltura cellulare, in genere automatizzata, che identifica i microrganismi tramite analisi fenotipica. Una tecnica emergente applica un approccio di tipo molecolare, utilizzando una PCR ad ampio spettro per amplificare l’RNA ribosomiale 16S o 18S che si caratterizza per la sua presenza in tutte le specie batteriche e fungine rispettivamente. Utilizzando un set di primer e probe universali in grado di identificare la maggior parte dei microrganismi solitamente presenti nei campioni, questa tecnica può essere usata per sostituire le colture cellulari nel controllo qualitativo. La PCR può essere eseguita con un approccio real-time o end-point, confrontandoli emerge che tramite l’analisi real-time si ha una sensibilità maggiore mentre la specificità rimane invariata. Questa tecnica può essere usata per assicurare la sterilità dei prodotti farmaceutici e per identificare nuove specie di microrganismi.