In questa tesi, si propone l'elaborazione di un metodo di analisi di amine bioattive tramite separazione HPLC e rivelazione in fluorescenza e spettrometria di massa. Tale tecnica è stata applicata alla misura degli standard di nove neurotrasmettitori particolarmente interessanti dal punto di vista neurologico: dopamina, feniletanolamina, feniletilamina, noradrenalina, octopamina, serotonina, sinefrina, tiramina e triptamina. Questi composti sono presenti nell'organismo umano a livelli di ultra-traccia, motivo per cui ogni passaggio deve essere ottimizzato con cura. Sono state esplorate molte condizioni cromatografiche e di rivelazione, con particolare attenzione per il processo di derivatizzazione cui vengono sottoposti gli analiti. Sono stati messi a confronto più agenti derivatizzanti (Dns-Cl, OPA, FMOC-Cl) ed è stato migliorato il procedimento al fine di ottenere la selettività e la sensibilità più elevate possibili. Inoltre, è stato osservato il comportamento massistico delle amine e sono state esplorate più modalità di analisi in MS/MS.

AMINE IN TRACCIA COME MARKER DI PATOLOGIE NEURODEGENERATIVE: ANALISI DI NEUROTRASMETTITORI MEDIANTE HPLC - SPETTROFLUORIMETRIA E SPETTROMETRIA DI MASSA

CIAIOLO, VALERIO
2008/2009

Abstract

In questa tesi, si propone l'elaborazione di un metodo di analisi di amine bioattive tramite separazione HPLC e rivelazione in fluorescenza e spettrometria di massa. Tale tecnica è stata applicata alla misura degli standard di nove neurotrasmettitori particolarmente interessanti dal punto di vista neurologico: dopamina, feniletanolamina, feniletilamina, noradrenalina, octopamina, serotonina, sinefrina, tiramina e triptamina. Questi composti sono presenti nell'organismo umano a livelli di ultra-traccia, motivo per cui ogni passaggio deve essere ottimizzato con cura. Sono state esplorate molte condizioni cromatografiche e di rivelazione, con particolare attenzione per il processo di derivatizzazione cui vengono sottoposti gli analiti. Sono stati messi a confronto più agenti derivatizzanti (Dns-Cl, OPA, FMOC-Cl) ed è stato migliorato il procedimento al fine di ottenere la selettività e la sensibilità più elevate possibili. Inoltre, è stato osservato il comportamento massistico delle amine e sono state esplorate più modalità di analisi in MS/MS.
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