Palinologia forense: l'analisi di pollini e spore vegetali nella risoluzione dei crimini.

The use of forensic science, which includes psychology, forensic biology, forensic chemistry, forensic medicine, forensic botany is increasing in the last years. Forensic palynology is a branch of forensic botany, an important tool for crime solving as: homicide, possession and manufactures of illegal drugs, counterfeiting, burglary, war crime. Some not forensic applications of palynology are: archeology, origin of crops, OGM diffusion, bulletin for person affect by pollen allergy. The usefulness of spores and pollen is a result of their small size, resistance to biological, chemical and mechanical degradation and complex morphology allowing many to be identified back to a parent plant and therefore to a know ecology or resource environment. Some applications of forensic palynology are: determination of primary crime scene and second crime scene, narrow the list of potential suspects, build a profile of suspect, and determine the season in which a crime was committed. Pollen and spore are ideal forensic trace material because the grain are small (3-200 µm), persistent (low degradability), highly variable (high biodiversity of plant and fungi) and found any items that has been exposed to or comes in contact with the air. Their ubiquity in the environment is due to the prolific production by plants and fungi. Spore (of algae, mosses, ferns and fungi) and pollen (of angiosperms and gymnosperms), often collectively identified as pollen, are used as a means of dispersal and reproduction by plants and fungi. Forensic palynology typically encompasses the examination of pollen and spores recovered from: people, object, soil, air filters, hair, fur, victim. Collection of evidence is the most difficult step of the process. It is necessary to avoid contamination during this process and collect all evidence on crime scene (with use of maps, police reports, photos and videos). Some technique of pollen recovery includes removal of mineral and organic matter through a series of treatment, sieving to consolidate the size fraction of interest, staining for better visibility and identification, and mounting the remain pollen rich residue on microscope slide for microscopic analysis (or for DNA analysis). The wide variety of sizes, symmetry, shape, apertures, sculpturing types are important morphological characteristics for identifications of pollen and spores. DNA analysis (after extraction of DNA with commercial kit or traditional methods) is important for pollen determination, the most important technique are SSR (Simple Sequence Repeats), Real Time PCR (a quantitative DNA analysis), DNA barcoding (species identification).The use of molecular markers is important especially for identifications of fungi, where morphological identification is more difficult. Forensic palynology is important in a great number of cases. One interesting case (here presented) was a murder happened in North of Italy some years ago. In that case the evidences provided by pollen analysis were confirmed by other types of forensic science (chemistry). In conclusion, forensic palynology is an important tool to analyze degraded material from crime scenes and for crime solving.

La palinologia forense, disciplina che fa parte della botanica forense, è un importante strumento nella risoluzione di diversi crimini tra cui: omicidi, traffico di sostanze stupefacenti, contraffazione, crimini di guerra. La palinologia forense si occupa di rilevare e analizzare pollini prelevati da: armi, veicoli, persone, sostanze stupefacenti, vestiti, corpo della vittima, suolo. La palinologia viene anche impiegata in ambito non forense: in archeologia, nella determinazione dell'origine delle specie coltivate, in studi sulla diffusione degli OGM, nell'elaborazione di bollettini pollinici. L'impiego di pollini e spore nella risoluzione dei casi investigativi è dovuto alle loro caratteristiche: resistenza a agenti biotici e abiotici, taglia ridotta, dispersione, differente morfologia. La palinologia forense, tramite campionamenti e analisi dei pollini, si occupa di fornire informazioni utili agli investigatori, per esempio indicando la scena del crimine primaria e secondaria. Un'altra informazione che può fornire la palinologia forense è l'epoca in cui viene commesso un determinato crimine. Campionamento.Il campionamento delle tracce polliniche è la fase più complessa dell'intero processo. È necessario campionare tutto il materiale importante alle indagini evitando la contaminazione dei campioni. Prima del campionamento si devono acquisire varie informazioni che sono di aiuto per gli operatori, queste informazioni sono reperibili da: rapporti di polizia, foto, video, mappe, elenco delle persone legate alla scena del crimine. Preparazione del campione. I campioni vengono preparati per le analisi successive, alcuni metodi per la preparazione dei campioni sono: impiego dell'aspiratore chirurgico, trattamenti con idrossido di sodio, impiego di acido acetico, filtrazione, acetolisi. A questo punto i campioni sono pronti per le analisi successive. Tecniche di analisi. Le tecniche di microscopia sfruttano le diversità morfologiche dei pollini provenienti da diverse specie per la loro determinazione, talvolta non è possibile determinare con precisione la specie ma solo il genere. I caratteri morfologici più importanti per l'osservazione al microscopio sono: taglia, aperture, rilevi superficiali, simmetria, forma della parte equatoriale e polare dei granuli. L'impiego dei marcatori molecolari è fondamentale dove la microscopia non consente di identificare con precisione quale organismo ha prodotto determinati pollini. I marcatori molecolari più importanti per la palinologia forense sono: SSR (Simple Sequence Repeats), DNA barcoding (anche quantitativo con qPCR). Caso di studio. A Milano la palinologia forense è stata usata nelle indagini relative a un caso di omicidio. Dalle analisi polliniche sono state formulate le seguenti ipotesi: la vittima non è stata uccisa dove è stato trovata, faceva uso di droghe, il suo cellulare è stato usato dopo la morte, nel sito dove è stato rinvenuto il corpo circolavano droghe, frequentava abitualmente il sito dove è stato trovato, la morte è avvenuta a inizio maggio. In conclusione le analisi polliniche sono un valido strumento nella risoluzione di vari crimini, permettendo di analizzare materiale molto degradato e confermare dati ottenuti da altre tecniche impiegate in ambito forense.