Caratterizzazione mediante HPLC/MS del quadro metabolico di agenti dopanti emergenti, ottenuto in vitro tramite l'utilizzo di enzimi epatici umani.

Rycal JTV-519 and SIRT1 activator MK-677 was found to enhance the physical performance. An in vitro assay employing microsomal and S9 human liver enzymes was developed to simulate phase-I and phase-II metabolic reactions, in order to obtain information about potential target analytes in doping control analysis. The metabolites were identified by liquid chromatography-mass spectrometry with electrospray ionization (LC-ESI¿MS) using high-resolution/high accuracy Orbitrap MSn analysis. The main routes of phase-I modifications involved mono-, di- and tri-hydroxylation, while subsequent phase II metabolic reactions do not led to glucuronated conjugates. The assay can serve as a potential screening or confirmation method for these analytes in clinical drug testing and doping control analysis in the future.

Il Rycal JTV-519 e l'attivatore delle SIRT1 MK-677 hanno mostrato un potenziale di incremento delle prestazioni fisiche. In questo lavoro è stato svolto un esperimento in vitro per simulare le reazioni metaboliche di fase I e di fase II utilizzando enzimi epatici umani, microsomiali e della frazione S9, per ottenere informazioni su molecole target per le analisi antidoping. I metaboliti sono stati identificati mediante cromatografia liquida-spettrometria di massa con ionizzazione elettrospray (LC-ESI¿MS) e analisi in MSn in alta risoluzione con l'Orbitrap. Il principale cammino delle reazioni di fase I ha prodotto metaboliti mono-,bi- e tri-ossidrilati, mentre non sono stati ottenuti i metaboliti glucuronati di fase II. Questo lavoro può servire per dei metodi di screening o di conferma di questi analiti in analisi o test di controllo antidoping.