Nei paesi occidentali, il consumo di frutta a guscio (mandorla, nocciola, noce, noce Pecan, noce del Brasile, anacardo, pistacchio, pinoli, etc.) è in incremento negli ultimi decenni, vista l'aumentata valorizzazione dei frutti a guscio come ¿alimenti salutari¿. Possono essere consumati freschi, tostati, o addizionati in prodotti da forno, prodotti dolciari e prodotti per la prima colazione. I frutti a guscio fanno, tuttavia , parte dei ¿big 8¿, ossia degli otto alimenti considerati maggiormente allergenici, insieme a latte, uova, soia, pesce, crostacei, grano e arachide. In questo lavoro di tesi, attraverso l'impiego di tecniche di proteomica, sono state estratte e separate per via elettroforetica le proteine idrosolubili e quelle associate ai corpi oleosi di mandorle crude e cotte al forno. In seguito, le proteine separate su gel di acrilamide sono state trasferite su membrane di nitrocellulosa ed incubate con il siero di 8 pazienti pediatrici, con confermata storia clinica di allergia alla mandorla. Le bande immuno-reattive sono state identificate via spettrometria di massa ed è stato valutato il loro potenziale allergenico in silico mediante valutazione della similitudine di sequenza con allergeni noti di organismi filogeneticamente vicini. Per quanto riguarda le proteine solubili, gli allergeni più frequentemente riconosciuti dalle IgE dei pazienti considerati sono la prunina 1 e 2 e la vicillina . Per quanto riguarda le proteine associate ai corpi oleosi, quelle maggiormente immuno-reattive sono risultate essere le oleosine, non ancora riconosciute nella mandorla come allergeni ma che sembrano, analogamente a quanto già dimostrato per altri frutti a guscio (nocciola, noce, etc.), le maggiori responsabili delle reazioni allergiche legate alla componente oleosa. Per entrambe le frazioni considerate (proteine solubili e legate ai corpi oleosi) la cottura a forno sembra non ridurre l'allergenicità, specialmente per quanto riguarda le oleosine.

Caratterizzazione molecolare della risposta allergica alla mandorla di pazienti pediatrici

CASTRI', CHIARA
2018/2019

Abstract

Nei paesi occidentali, il consumo di frutta a guscio (mandorla, nocciola, noce, noce Pecan, noce del Brasile, anacardo, pistacchio, pinoli, etc.) è in incremento negli ultimi decenni, vista l'aumentata valorizzazione dei frutti a guscio come ¿alimenti salutari¿. Possono essere consumati freschi, tostati, o addizionati in prodotti da forno, prodotti dolciari e prodotti per la prima colazione. I frutti a guscio fanno, tuttavia , parte dei ¿big 8¿, ossia degli otto alimenti considerati maggiormente allergenici, insieme a latte, uova, soia, pesce, crostacei, grano e arachide. In questo lavoro di tesi, attraverso l'impiego di tecniche di proteomica, sono state estratte e separate per via elettroforetica le proteine idrosolubili e quelle associate ai corpi oleosi di mandorle crude e cotte al forno. In seguito, le proteine separate su gel di acrilamide sono state trasferite su membrane di nitrocellulosa ed incubate con il siero di 8 pazienti pediatrici, con confermata storia clinica di allergia alla mandorla. Le bande immuno-reattive sono state identificate via spettrometria di massa ed è stato valutato il loro potenziale allergenico in silico mediante valutazione della similitudine di sequenza con allergeni noti di organismi filogeneticamente vicini. Per quanto riguarda le proteine solubili, gli allergeni più frequentemente riconosciuti dalle IgE dei pazienti considerati sono la prunina 1 e 2 e la vicillina . Per quanto riguarda le proteine associate ai corpi oleosi, quelle maggiormente immuno-reattive sono risultate essere le oleosine, non ancora riconosciute nella mandorla come allergeni ma che sembrano, analogamente a quanto già dimostrato per altri frutti a guscio (nocciola, noce, etc.), le maggiori responsabili delle reazioni allergiche legate alla componente oleosa. Per entrambe le frazioni considerate (proteine solubili e legate ai corpi oleosi) la cottura a forno sembra non ridurre l'allergenicità, specialmente per quanto riguarda le oleosine.
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