L'epatite C è una preoccupante realtà della sanità pubblica: ogni anno sempre più persone si aggiungono alla lista degli infetti e, purtroppo, la realizzazione di un vaccino risulta difficoltosa.
La conoscenza sempre più approfondita del ciclo replicativo di HCV, l'agente eziologico di tale patologia, ha permesso lo sviluppo dei Direct Acting Agents (DAAs): una nuova classe di farmaci ad azione diretta. Ciò ha comportato una significativa evoluzione della terapia: dalla duplice, trattamento consistente nella somministrazione di Interferone e Ribavirina (RBV), ad azione aspecifica sul virus, alla triplice, che comprende, oltre ai due farmaci precedenti, anche Boceprevir (BOC) o Telaprevir (TEL), inibitori della proteasi virale (PI).
Dal 2012 la triplice è diventata il nuovo ¿standard of care¿ per il trattamento dell'infezione cronica con genotipo 1 di HCV. Come tutte le molecole esogene introdotte nel nostro organismo, anche questi nuovi farmaci comportano una serie di effetti collaterali, tra cui una diminuzione dell'attività renale con conseguente accumulo di RBV e l'accentuazione dell'anemia, fenomeno già relazionato con la duplice terapia.
Per affrontare questo tipo di problematiche, e per rendere sempre più ¿personalizzata¿ la terapia, la Farmacogenetica, disciplina che va acquistando sempre più importanza, è stata affiancata al Terapeutic Drug Monitoring (monitoraggio plasmatico dei farmaci e modifica delle dosi somministrate sulla base dei relativi risultati).
In questo lavoro di tesi sperimentale, abbiamo pertanto analizzato l'influenza di alcuni SNPs (Single Nucleotide Polymorphisms) sul profilo farmacocinetico di queste molecole, e quindi, indirettamente, su eventuali interazioni farmacologiche tra RBV e BOC (31 pazienti) e TEL (29 pazienti).
In particolare, abbiamo posto la nostra attenzione sui trasportatori SLC (hCNT2, hCNT3 ed hENT1), i quali hanno la RBV come substrato; sulla classe dei trasportatori ABC (glicoproteina-P, ABCG2 e BSEP) e l'enzima AKR (aldoketoreduttasi) per quanto riguarda il BOC; e infine, glicoproteina-P e BSEP per il TEL.
I risultati ottenuti mostrano una lieve influenza dello SNP ABCB1 1236 C>T (p-value= 0,041), senza presentare tuttavia, un trend specifico, sull'andamento delle concentrazioni del BOC; mentre non vi è influenza da parte dello SNP AKR1 C>G (p-value=0,177).
Per quanto riguarda le concentrazioni del TEL, è risultata un'influenza significativa da parte dei seguenti SNPs: ABCB1 2677 G>T (p-value=0,006), ABCB1 1236 C>T (p-value=0,015), BSEP 1331 T>C (p-value=0,033), mentre non vi è significatività per lo SNP ABCB1 3435 C>T (p-value=0,374). I polimorfismi rimanenti hanno riportato dei valori molto distanti dalla significatività statistica.
Inoltre, dall'analisi di regressione lineare univariata e multivariata è emerso che il metavir score e CNT2-146 T>A sarebbero in grado di prevedere delle concentrazioni di TEL minori; invece BSEP 1131 T>C e ABCB1 2677 G>T sembrerebbero essere fattori predittivi positivi.
Concludendo, nonostante il numero esiguo di pazienti coinvolti nello studio, i nostri risultati hanno permesso di ipotizzare che RBV e PI condividerebbero una o più tappe metaboliche durante il loro destino nell'organismo; che la glicoproteina-P sarebbe in grado di influenzare molto di più le concentrazioni di TEL rispetto a quelle di BOC; ma soprattutto, è stato possibile individuare BSEP come nuovo trasportatore per il TEL.
Si tratta di nuovi dati che, oltre a permettere di aggiungere informazioni sempre più dettagliate sul destino di queste molecole, possono essere utilizzati a livello sperimentale per meglio modulare la terapia nei pazienti trattati. Essi, comunque rappresentano solo il punto iniziale di studi più approfonditi che ci si propone di realizzare in futuro, soprattutto ampliando la casistica e replicandoli in più coorti.
Hepatitis C is a disturbing reality of public health: every year the number of infected patients increases and, unfortunately the vaccine is difficult to be performed. The knowledge of the HCV cycle virus, the infective agent of this pathology, has allowed the development of Direct Acting Agents (DAAs): a new class of direct action drugs. This leads to a significant evolution of therapy: from the dual treatment consisting in the administration of Interferon and Ribavirin (RBV), with a non-specific action on the virus, to the triple therapy, which includes, in addition to the two older drugs, inhibitors of the viral protease (PI) Boceprevir (BOC) or telaprevir (TEL).
Since 2012, the triple therapy has become the new "standard of care" for the treatment of chronic HCV genotype 1. As well all exogenous molecules introduced into our body, these new drugs have a great number of side effects, including a decreased renal activity resulting in RBV accumulation and an higher rate of anemia, a phenomenon already reported with dual therapy.
Pharmacogenetics is becoming more important in clinical practice, and it is often performed with Terapeutic Drug Monitoring (the monitoring of plasma drug concentration with the dose modification of the administered drugs) customizing therapy.
Therefore, in this work we analyzed the influence of some SNPs (Single Nucleotide Polymorphisms) on the pharmacokinetic profile of these drugs, and then, indirectly, any possible drug interactions between RBV and BOC (31 patients) and TEL (29 patients). In particular, we focused our attention on the SLC transporters (hCNT2, hCNT3 and hENT1), which use RBV as substrate; on the class of ABC transporters (P-glycoprotein, ABCG2 and BSEP) and the enzyme AKR (aldoketoreduttasi) for BOC; and finally, P-glycoprotein and BSEP for TEL.
Results showed a slight influence on BOC concentrations of ABCB1 1236 C> T SNP (p-value = 0.041), without presenting, however, a specific trend; moreover there was not influence from the AKR1 C> G SNP (p-value = 0.177). Regarding TEL concentrations, a significant influence was shown for the following SNPs: ABCB1 2677 G> T (p-value = 0.006), ABCB1 1236 C> T (p-value = 0.015), BSEP 1331 T> C (p-value = 0.033), whereas there was not statistical significance about ABCB1 3435 C> T SNP (p-value = 0.374). Other SNPs showed no influence on BOC and TEL plasma concentrations.
Furthermore, the analysis of univariate and multivariate linear regression showed that the metavir score and CNT2-146 T>A are able to predict the lower concentrations of TEL; instead BSEP 1131 T> C and ABCB1 2677 G> T seem to be positive predictors.
In conclusion, despite the small number of patients involved in the study, our results have hypothesized that RBV and PI would share one or more common "metabolic" stages during their presence in the body; that P-glycoprotein is be able to influence much more TEL concentrations compared to BOC concentrations; but above all, it has been possible to identify for the first time BSEP as a new carrier for TEL.
These new data allow to give more detailed information about these molecules, but they can be also used experimentally to better modulate therapy in treated patients.
These results represent only the starting point for further detailed studies, that would be carried on by the increasing number of patients and replicating in different cohorts.