Sperm DNA fragmentation in couples with recurrent pregnancy loss sine causa
L’aborto spontaneo ricorrente (ASR) è definito come la perdita di due o più gravidanze entro la ventiquattresima settimana di gestazione, come indicato dalle linee guida della Società Europea di Riproduzione Umana ed Embriologia (ESHRE). L'eziopatogenesi è eterogenea e in circa il 50-60% dei casi non è possibile individuare alcuna causa nota, pertanto si determina una condizione di abortività ricorrente sine causa. Nel passato l’ASR è stato considerato un problema derivante esclusivamente da cause femminili ma, recentemente, diversi ricercatori hanno studiato l'effetto dei fattori maschili sul tale condizione patologica.
L’obiettivo del presente studio è stato quello di valutare la qualità del liquido seminale, la frammentazione del DNA nemaspermico e lo stato ossidativo in soggetti maschili di coppie affette da ASR. Lo studio ha esaminato 92 soggetti maschili di coppie ASR e 16 uomini le cui partner hanno completato con successo almeno una gravidanza entro l'anno precedente al reclutamento (gruppo CTRL). I parametri del liquido seminale sono stati esaminati attraverso lo spermiogramma, eseguito secondo i criteri del manuale WHO (V edizione, 2010). La frammentazione del DNA nemaspermico è stata determinata calcolando l’indice di frammentazione (DFI) attraverso lo Sperm Chromatin Structure Assay (SCSA), mentre lo stato ossidativo è stato valutato utilizzando il test al Nitroblue Tetrazolio (NBT test).
Dai risultati ottenuti abbiamo osservato che, nonostante vi siano differenze significative tra i due gruppi in termini di morfologia, in entrambi i gruppi (ASR e CTRL) i valori dello spermiogramma sono superiori al quinto percentile, pertanto considerati nella norma. Per quanto riguarda le analisi di secondo livello, abbiamo osservato una differenza statisticamente significativa in termini di DFI tra i due gruppi mentre non vi sono differenze nei valori dello stato ossidativo. Nel gruppo ASR, il DFI è correlato positivamente con età, percentuale di spermatozoi non mobili e difetti della coda dello spermatozoo e negativamente con BMI, concentrazione, percentuale di cellule con motilità progressiva e percentuale di cellule con morfologia normale. È stato poi suddiviso il gruppo di soggetti ASR in tre sottogruppi, in base al valore di DFI, confermando l’importanza della valutazione di tale parametro per la popolazione oggetto dello studio poiché i soggetti con DFI elevato presentano un quadro seminale generalmente peggiore.
In conclusione, si può affermare che lo studio della frammentazione del DNA nemaspermico potrebbe risultare uno strumento utile per caratterizzare meglio la qualità del liquido seminale in soggetti maschili di coppie affette da ASR per stratificare i pazienti, provare a individuare una causa della loro condizione e indirizzarli meglio verso trattamenti terapeutici o tecniche di fecondazione assistita più opportuni.
Recurrent pregnancy loss (RPL) is defined as the loss of two or more pregnancies within the 24th week, according to the European Society of Human Reproduction and Embryology guidelines (ESHRE). The etiopathogenesis is heterogeneous and in about 50-60% of cases it is not possible to identify any known cause, therefore a condition of recurrent abortion sine causa is determined. In the past, RPL has been considered an exclusively female-derived problem but recently several researchers have studied the effect of male factors on this pathological condition.
The objective of this study was to evaluate the quality of semen, the sperm DNA fragmentation, and the oxidative state in male subjects of couples affected by RPL.
The study investigated 92 male subjects from RPL couples and 16 male whose partners successfully completed at least one pregnancy within the year before the recruitment (CTRL group). Seminal parameters were examined through the spermiogram, according to the WHO criteria (V edition, 2010). Sperm DNA fragmentation was evaluated calculating the DNA fragmentation index (DFI) through the Sperm Chromatin Structure Assay (SCSA), while the oxidative state was assessed by the Nitroblue Tetrazolium test (NBT test).
We observed that, despite there are significant differences between the two groups in terms of morphology, in both (RPL and CTRL) spermiogram values are above the fifth percentile, therefore considered normal.
With second level analysis, we observed a statistically significant difference in terms of DFI between the two groups, while no significant differences were observed between the two groups in terms of oxidative status.
In the RPL group, DFI correlates positively with age, immobility sperms, and percentage of cells with tail defects and negatively with BMI, concentration, cell with progressive motility and with normal cell morphology.
The group of RPL subjects was then divided into three subgroups, based on the DFI value, confirming the importance of the evaluation of this parameter for this population, since subjects with a high DFI have generally a worse seminal quality.
In conclusion, it can be asserted that the study of sperm DNA fragmentation could be a useful tool to better characterize the quality of seminal fluid in male subjects of couples affected by RPL to stratify patients, to identify a cause of their condition and to better address them to more appropriate therapeutic treatments or best assisted reproduction techniques.